İncə təbəqə xromatoqrafiyası, qalınlığı 0,1-0,5 mm olan sorbent təbəqəsinin hərəkətsiz faza kimi istifadəsinə əsaslanan kimyəvi analiz metodudur. TLC metodu müxtəlif sahələrdə istifadə edilə bilər və müxtəlif kimyəvi birləşmələrin təyin edilməsinə imkan verir.
Metod prinsipi
İncə təbəqəli xromatoqrafiya üsulu kağız xromatoqrafiyasından yaranıb və ilk təcrübələr 19-cu əsrin 80-ci illərində aparılıb. Bu analizin aktiv istifadəsi yalnız 1938-ci ildən sonra başladı.
TLC texnikasına mobil faz (yuyucu), hərəkətsiz faz (sorbent) və analit daxildir. Stasionar faz xüsusi bir plitə üzərində tətbiq olunur və sabitlənir. Plitə şüşə, alüminium və ya plastikdən hazırlana bilər - bunlar hər istifadədən sonra hərtərəfli yuyulmalı, qurudulmalı və sorbentin tətbiqi üçün hazırlanmalı olan yenidən istifadə edilə bilən substratlardır. İstifadədən sonra atılan kağız lövhələrdən də istifadə etmək mümkündür.
Silika gel ən çox stasionar faz olaraq istifadə olunur, lakin digər sorbentlərdən, məsələn, alüminium oksiddən istifadə etmək mümkündür. Bu və ya digər sorbentdən istifadə edilərkən, nəticənin dəqiq olması üçün texnologiyaya ciddi şəkildə riayət edilməlidir, məsələn, laboratoriyada hava çox nəmdirsə silika jel səhv bir nəticə verə bilər.
Solventlər mobil faz olaraq istifadə olunur, məsələn su, sirkə turşusu, etanol, aseton, benzol. Bir həlledici seçimi məsuliyyətlə aparılmalıdır, çünki xromatoqrafiyanın nəticəsi birbaşa keyfiyyətlərindən (özlülük, sıxlıq, saflıq) asılıdır. Təhlil olunan hər bir nümunə üçün fərdi bir həlledici seçilir.
Təhlil
Nümunə bir həlledicidə seyreltilməlidir. Tam bir həll olmazsa və çox sayda çirk varsa, nümunə ekstraktı ilə təmizlənə bilər.
Nümunənin lövhəyə tətbiqi avtomatik və ya əl ilə edilə bilər. Avtomatik tətbiq, hər bir nümunənin substratın müvafiq sahəsinə püskürdüyü bir mikro sprey üsulu istifadə edir. Əl ilə tətbiq etmək üçün bir mikropipet istifadə olunur. Hər nümunə üçün boşqaba qələm işarələri qoyulur. Hər nümunə qurğuşundan olan karbonla reaksiya verməmək üçün lövhələrə işarələrdən kifayət qədər məsafədə bir sətirdə bir kapilyar ilə tətbiq olunur.
Plitə boşluğa dökülən altındakı bir qaba qoyulur. Dəstək bir kənarla işarələnmiş xəttə qədər gəmiyə yerləşdirilir. Gəmi, mobil fazın buxarlanmaması üçün möhkəm bağlanmışdır. Kapilyar qüvvələrin təsiri altında yuyucusu sorbent qatından yuxarı qalxmağa başlayır. Eluent müəyyən bir səviyyəyə çatdıqda, boşqab qabdan çıxarılır və qurudulur.
İstədiyiniz maddənin rəngi yoxdursa, substratda görünməyəcəkdir. Buna görə vizualizasiya aparılır - plitənin yod buxarı və ya digər boyalarla işlənməsi.
Belə emaldan sonra nəticə qiymətləndirilir. Müxtəlif intensivlikdə rəngli sahələr sorbentdə görünür. Bir maddəni (və ya bir qrup maddəni) müəyyən etmək üçün rəngli sahələr, ölçüləri, intensivliyi və hərəkətliliyi bir istinad nümunəsi ilə müqayisə edilir.
TLC metodu sürətli, ucuz, dəqiq, intuitiv, mürəkkəb avadanlıq tələb etmədiyi və izahı asan olduğu üçün geniş istifadə olunur.
